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豬支原體抗體(MAb)ELISA試劑盒實驗使用說明書

發表時間:2025/6/10  |  點擊率:138
 
提 供 商: 天津天正信達生物科技有限公司 資料大?。?/td>
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  豬支原體抗體(MAb)ELISA試劑盒實驗使用說明書

  以下是豬支原體抗體(MAb)ELISA試劑盒的實驗使用說明綜合指南:

  BS-4652 豬支原體抗體(MAb)ELISA試劑盒

  一、實驗原理

  采用雙抗原夾心法或間接法ELISA技術,通過包被抗原與樣本中抗體結合,再與HRP標記抗原/抗體形成復合物,經TMB顯色后測定450nm吸光度(OD值),顏色深淺與抗體濃度呈正相關。

  二、試劑盒組成

  預包被微孔板

  標準品(凍干粉,需復溶)

  酶標試劑(HRP標記物)

  濃縮洗滌液(20-30倍稀釋使用)

  TMB顯色底物

  終止液(酸性溶液)

  說明書及質檢報告

  三、樣本處理要求

  血清?:室溫凝固2小時或4℃過夜后離心(1000×g, 20分鐘),避免溶血或反復凍融。

  血漿?:EDTA/肝素抗凝,30分鐘內離心(1000×g, 15分鐘)。

  組織勻漿?:按1:9比例用PBS勻漿,離心取上清。

  四、標準品稀釋步驟

  復溶:加入1mL稀釋液溶解凍干標準品(10,000pg/mL母液)。

  梯度稀釋:按說明書進行倍比稀釋(如5,000→2,500→...→78pg/mL),標準品稀釋液作空白對照。

  五、實驗操作流程

  加樣?:

  標準品孔:50μL不同濃度標準品(雙復孔)

  樣本孔:50μL待測樣本。

  孵育?:37℃溫育60分鐘,洗板5次(每孔350μL洗滌液)。

  顯色?:每孔加TMB底物50μL,37℃避光反應15分鐘。

  終止?:加終止液50μL,15分鐘內測OD450值。

  六、注意事項

  試劑平衡:使用前室溫平衡30分鐘,濃洗滌液需水浴助溶。

  質量控制:批內CV<10%,批間CV<12%。

  干擾因素:細菌污染、反復凍融、溶血會導致假陽性/假陰性。

  結果判讀:建議用四參數擬合標準曲線計算濃度。

  七、常見問題

  顯色異常?:檢查顯色劑有效期及避光情況。

  洗板誤差?:確保充分洗滌,避免孔間交叉污染。

  標準曲線異常?:檢查稀釋準確性及酶標儀校準。

  (注:具體操作參數請以試劑盒說明書為準)

  注:以上資料僅供參考,具體請咨詢技術老師及品牌供應商!

 
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